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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(UC-MSCs)是一類來源于發(fā)育早期中胚層的多能干細(xì)胞，與其他來源的MSCs相比，來源于臍帶的MSCs具有采集方便、無倫理爭(zhēng)議、免疫原性低、自我更新快、倍增速度穩(wěn)定和增殖能力強(qiáng)等特點(diǎn)。此外，來源于臍帶的MSCs的外泌體攜帶多種傷口愈合的相關(guān)因子，能夠促進(jìn)成纖維細(xì)胞的遷移、增殖和膠原合成，因此臍帶MSCs外泌體被認(rèn)為是臨床細(xì)胞治療和再生醫(yī)學(xué)的首選。

該產(chǎn)品由臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)獲得的上清液分離純化得到的外泌體，可用于實(shí)驗(yàn)對(duì)照、直接進(jìn)行負(fù)載和靶向改造、組織修復(fù)等研究。

產(chǎn)品性質(zhì)

儲(chǔ)存條件：-80 ℃，1年

案例展示

1：NTA檢測(cè)外泌體的粒徑分布和顆粒濃度：

將得到的外泌體震蕩分散均勻，用PBS稀釋至合適倍數(shù)，標(biāo)記好樣本名稱、稀釋倍數(shù)、完成樣本的稀釋配制；測(cè)樣之前，先測(cè)試稀釋液：移液槍吸取200 μL稀釋液上機(jī)檢測(cè)，確認(rèn)組件、儀器都處于正常運(yùn)行；稀釋液測(cè)量完成，測(cè)試結(jié)果正常后開始測(cè)試樣本，取稀釋后的200 μL樣本上機(jī)檢測(cè)；待計(jì)數(shù)顆粒數(shù)達(dá)到100個(gè)以上時(shí)停止測(cè)試，導(dǎo)出數(shù)據(jù)結(jié)果，完成樣本檢測(cè)。

2：TEM觀察外泌體的形態(tài)：

重懸外泌體至50-100 μL 2% PFA中，將5 μL混合懸液加到Formvar-carbon載樣銅網(wǎng)上；也可將5-10 μL混合懸液滴加到封口膜上，將銅網(wǎng)Formvar膜面朝下放在懸液上。每個(gè)樣品準(zhǔn)備2-3個(gè)銅網(wǎng)；將100 μL PBS加到封口膜上。用鑷子將銅網(wǎng) (Formvar膜面朝下) 放在PBS液滴上清洗（在所有步驟中，都應(yīng)保持Formvar膜面濕潤，而另一面干燥）；將銅網(wǎng)放在50 μL 1%戊二醛液滴上5 min；將銅網(wǎng)放在100 μL ddH₂O洗滌8次，每次洗2 min；將銅網(wǎng)放在50 μL草酸雙氧鈾液滴上（pH 7.0），5 min；將銅網(wǎng)放在50甲基纖維素液滴上10 min，冰上操作；銅網(wǎng)放到樣品臺(tái)頂端的不銹鋼環(huán)上，用濾紙吸去多余液體；空氣中干燥5-10 min；將銅網(wǎng)放在樣品盒內(nèi)，80 kV下拍攝電鏡照片。

3：Western Blot檢測(cè)外泌體標(biāo)志物（三陽一陰）：

將分離純化得到的外泌體加入裂解液，裂解后吸取上清液，根據(jù)測(cè)定蛋白濃度稀釋樣本至合適濃度；裂解液加入4×LDS上樣緩沖液（B0007，Invitrogen），95 ℃煮5 min，待降至室溫后，瞬離；加樣：將15 μL樣本全部加到泳道中，并在樣本首尾加上marker；電泳：190 V，70 min；提前10 min用甲醇活化PVDF膜；轉(zhuǎn)膜：轉(zhuǎn)膜液需要提前預(yù)冷，275 mA，70 min；封閉：配置1% BSA的TBST溶液，室溫封閉1 h；孵育一抗：4 ℃，搖床上過夜，抗體用1% BSA的TBST溶液稀釋；洗膜：1×TBST洗三次，10 min/次；孵育二抗：抗體用1% BSA的TBST溶液稀釋，室溫?fù)u床1 h；洗膜：1×TBST洗三次，10 min/次；曝光拍照。

注意事項(xiàng)

本品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究使用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品。