一级呦女专区毛片-亚洲韩国日本欧美一区二区三区-国产一区二区在线视频-国产亚洲欧洲精品一区-555成人网免费观看视频-亚洲免费成人大片-国产精品久久久久久岛

歡迎蒞臨南京沃博生物科技有限公司官方網(wǎng)站!

當(dāng)前位置: 首頁 - 產(chǎn)品目錄 - 生化試劑盒

糖原磷酸化酶b(GPb)檢測試劑盒(分光光度法 50T/24S)

貨號 SH0494 售價(jià)(元) 960
規(guī)格 50T/24S CAS號
  • 產(chǎn)品簡介
  • 相關(guān)產(chǎn)品

貨號

名稱

規(guī)格

SH0494

糖原磷酸化酶b(GPb)檢測試劑盒(分光光度法 50T/24S)

50管/24樣

正式測定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定                                             

測定意義:

糖原磷酸化酶(Glycogen phosphorylase,GPEC 2.4.1.1))是糖原分解代謝的關(guān)鍵酶,使糖原分子從非還原端逐個(gè)斷開α-14-糖苷鍵移去葡萄糖基,釋放1-磷酸葡萄糖,直至臨近糖原分子α-16-糖苷鍵分支點(diǎn)前4個(gè)葡萄糖基處。GP分為有活性的糖原磷酸化酶aGPa)和無活性的糖原磷酸化酶bGPb)兩種形式。GPb在一定濃度的腺苷酸(5,-AMP)存在下可被激活。

測定原理:

GP催化糖原和無機(jī)磷產(chǎn)生葡萄糖殘基生成糖原和1-磷酸葡萄糖,磷酸葡萄糖變位酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶進(jìn)一步依次催化NADP還原生成NADPH,在340nm下測定NADPH上升速率,即可反映GP活性。添加一定濃度的腺苷酸(5-AMP)時(shí)測定GPGPaGPb)活性,未添加腺苷酸(5-AMP)時(shí)測定GPa活性,GP活性-GPa活性得到GPb活性。

組成:

產(chǎn)品名稱

SH0494-50T/24S

Storage

提取液:液體

60ml

4℃

試劑一:液體

40ml

4℃

試劑二:粉劑

1

-20℃

試劑三:粉劑

1

-20℃

試劑四:粉劑

1

-20℃

試劑五:粉劑

1

-20℃

說明書

一份

自備儀器和用品:

紫外分光光度計(jì)、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1ml石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

樣本的前處理: 

按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

測定步驟:

1、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至340nm,蒸餾水調(diào)零;

2、 工作液的配制:臨用前將試劑二轉(zhuǎn)移到試劑一中混合溶解待用;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。

3、 試劑三的配制:臨用前在試劑三瓶中加入2.5ml蒸餾水充分溶解待用;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。

4、 試劑四的配制:臨用前在試劑四瓶中加入2.5ml蒸餾水充分溶解待用;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。

5、 試劑五的配制:臨用前在試劑五管中加入1.25ml蒸餾水充分溶解待用;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。

6、 將工作液、試劑三、試劑四和試劑五置于37℃預(yù)熱5分鐘;

7、 1ml石英比色皿中加入50μl樣本、50μl試劑三、50μl試劑四、50μl蒸餾水800μl工作液,立即混勻,記錄340nm5min后的A110min后的吸光值A2,計(jì)算ΔAGPa=A2-A1。

8、 1ml石英比色皿中加入50μl樣本、50μl試劑三、50μl試劑四、50μl試劑五800μl工作液,立即混勻,記錄340nm5min后的A310min后的吸光值A4,計(jì)算ΔAGP=A4-A3

注意:由于每個(gè)樣本需要同時(shí)測一個(gè)GPGPaGPb)活性和一個(gè)GPa活性,因此本試劑盒50管測24個(gè)樣本。

GPb活性計(jì)算:

1)按樣本蛋白濃度計(jì)算

單位定義:每mg組織蛋白每分鐘產(chǎn)生1nmol NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。

GPbnmol/min/mg prot)=[(ΔAGPΔAGPa)×V反總÷ε×d×109]÷(V×Cpr) ÷T=643×(ΔAGPΔAGPa)÷Cpr

2)按樣本鮮重計(jì)算

單位定義:每g組織每分鐘產(chǎn)生1nmol NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。

GPbnmol/min/g 鮮重)=[(ΔAGPΔAGPa)×V反總÷ε×d×109]÷(W ×V÷V樣總)÷T=643×(ΔAGPΔAGPa)÷W

V反總:反應(yīng)體系總體積,1×10-3 L;εNADPH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.05 ml;V樣總:加入提取液體積,1 ml;T:反應(yīng)時(shí)間,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/ml;W:樣本質(zhì)量,g。

 

 

2018高清国产一区二区三区 | 国产漂亮白嫩美女在线观看 | 大香区一二三四区2021 | 免费A级毛片—亚洲一区二区久久69 | 亚洲综合另类欧美久久久久精品 | 四虎影视永久在线观看 | 精品国产刺激国语对白 | 久久午夜夜伦鲁鲁片无码免费 | 老女人的情欲完整版手机在线播放 | 99国精品午夜福利视频不卡 | 中文字幕av蜜臀av色欲av | 嫩BBB槡BBBB槡BBBB | 国产午夜人做人免费视频APP | 一级毛片视频免费 | mm1313午夜视频 | 神马免费午夜福利剧场 | 美妇乱人伦视频中文字幕 | 国产亚洲综合99久久系列 | 日韩精品成人av高清在线观看 | 亚洲精品拍拍央视网出文 | 久久综合九色综合91 | JVID亚洲精品无圣光图套 | 中文在线免费不卡视频 | 国产精品综合一区二区三区 | 成人免费肉动漫无遮网站 | 久久久精品中文字幕麻豆发布 | 国产精品亚洲精品日韩已方 | 国产欧美日韩精品一区二区三区蜜桃不卡 | 色一情一交一乱一区二区三区 | 夜里十大禁用短视频软件 | 成人无码WWW免费视频网站 | 亚洲国产欧美中日韩成人综合视频 | 91桃色污无限免费看 | 日本内射精品一区二区视频 | 欧美激情综合色综合啪啪五月 | 国产又爽又黄又不遮挡视频 | 国产清纯美女爆白浆视频 | 成人区精品一区二区毛片不卡 | 91麻豆国产福利精品 | 国产精品秘 麻豆果冻传媒沈娜娜 | 欧美日韩国产免费一区二区三区 |