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土壤漆酶（Soil Laccase，SL）檢測(cè)試劑盒（微量法100T/48S）
| 貨號(hào) | SH0368 | 售價(jià)（元） | 1560 |
| 規(guī)格 | 100T/48S | CAS號(hào) |
- 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
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貨號(hào) |
名稱 |
規(guī)格 |
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SH0368 |
土壤漆酶（Soil Laccase，SL）檢測(cè)試劑盒（微量法100T/48S） |
100T/48S |
測(cè)定意義：
漆酶（Laccase）是一種含銅的多酚氧化酶，屬于銅藍(lán)氧化酶家族，廣泛分布于真菌和高等植物中，具有較強(qiáng)的氧化還原能力，在紙漿生物漂白，環(huán)境污染物降解和木質(zhì)纖維素降解以及生物檢測(cè)方面有非常廣泛的應(yīng)用。
測(cè)定原理：
漆酶分解底物ABTS產(chǎn)生ABTS自由基，在420nm處的吸光系數(shù)遠(yuǎn)大于底物ABTS，測(cè)定ABTS自由基的增加速率，可計(jì)算得漆酶活性。
試劑組成和配制：
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產(chǎn)品名稱 |
SH0368-100T/48S |
Storage |
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試劑一：液體 |
40ml |
4℃ |
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工作液：粉劑 |
2瓶 |
4℃避光 |
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說明書 |
一份 |
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工作液：粉劑×2瓶，4℃避光保存，臨用前每瓶加10ml試劑一溶解。
自備儀器和用品：
天平、低溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、震蕩儀。
樣品處理：
新鮮土樣風(fēng)干，過30-50目篩。
測(cè)定步驟：
1、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到420nm，蒸餾水調(diào)零。
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對(duì)照管 |
測(cè)定管 |
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樣本（g） |
0.02 |
0.02 |
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試劑一（μl） |
250 |
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工作液（μl） |
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250 |
37℃震蕩反應(yīng)10min，冰浴5min，10000g，4℃離心5min，分別取上清200μl于420nm處測(cè)定吸光值，記為記為A對(duì)照和A測(cè)定。△A=A測(cè)定-A對(duì)照。
酶活性計(jì)算公式：
a. 用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下
酶活性定義：每克土壤每分鐘氧化1nmol底物ABTS所需的酶量為一個(gè)酶活力單位（U）。
SL活性（nmol/min /g土樣）= 
×V反總÷W÷T= 0.694×△A÷W
ε：ABTS毫摩爾消光系數(shù)：36L/mmol/cm；d：比色皿光徑，1cm；V反總：反應(yīng)總體積，0.25ml；W：樣本質(zhì)量，g；T：反應(yīng)時(shí)間，10min
b. 用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下
酶活性定義：每克土壤每分鐘氧化1nmol底物ABTS所需的酶量為一個(gè)酶活力單位（U）。
SL活性（nmol/min /g土樣）= 
×V反總÷W÷T= 1.388×△A÷W
ε：ABTS毫摩爾消光系數(shù)：36L/mmol/cm；d：比色皿光徑，0.5cm；V反總：反應(yīng)總體積，0.25ml；W：樣本質(zhì)量，g；T：反應(yīng)時(shí)間，10min
注意事項(xiàng)：
1、工作液需臨用前配制，并且盡快使用，4℃保存一周，若變色則不能使用。
2、測(cè)定之前進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，若吸光值較高，請(qǐng)將樣品用提取液進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂屧贉y(cè)定，并在計(jì)算公式中乘以稀釋倍數(shù)。