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直鏈淀粉檢測(cè)試劑盒(微量法 100T/96S)

貨號(hào) SH0286 售價(jià)(元) 1440
規(guī)格 100T/96S CAS號(hào)
  • 產(chǎn)品簡介
  • 相關(guān)產(chǎn)品

貨號(hào)

名稱

規(guī)格

SH0286

直鏈淀粉檢測(cè)試劑盒(微量法 100T/96S)

100T/96S

正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定

測(cè)定意

直鏈淀粉是D-葡萄糖基以a-(1,4)糖苷鍵連接的多糖鏈,其含量測(cè)定對(duì)于評(píng)價(jià)食品營養(yǎng)價(jià)值和調(diào)查植物體內(nèi)糖代謝都有重要意義。

測(cè)定原理:

利用80%乙醇可以把樣品中可溶性糖與淀粉分開,直鏈淀粉與碘形成的絡(luò)合物在620nm下有吸收峰。

組成:

組分名稱

SH0286-100T/96S

Storage

試劑一:液體

100ml

4℃

     試劑二:乙醚(自備)

100ml

4℃

試劑三:液體

100ml

4℃

試劑四:液體

2ml

4℃

試劑五:液體

 300μl

l

4℃

說明書

一份

 

自備儀器和用品:

酶標(biāo)儀/可見分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、96孔板/微量石英比色皿、研缽、冰、乙醚和蒸餾水。

淀粉提?。?/span>

稱取0.01~0.02g烘干樣本(建議稱取約0.01g)于研缽中研碎,加入1ml試劑一,充分勻漿后轉(zhuǎn)移到EP管中,80℃水浴提取30min,3000g,25℃離心5min,棄上清,留沉淀,加入1ml試劑二(乙醚)振蕩5min3000g,25℃離心5min,棄上清,留沉淀,加入1ml試劑三充分溶解,90℃水浴10min,冷卻后待測(cè)。

測(cè)定步驟:

1、分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至620nm,蒸餾水調(diào)零。

測(cè)定管:在96孔板或微量石英比色皿中依次加入20μL樣本, 14μL試劑四,120μL蒸餾水,2μL試劑五,44uL蒸餾水,混勻,測(cè)定620nm處吸光值,記為A測(cè)定。

空白管:在96孔板或微量石英比色皿中依次加入20μL試劑三, 14μL試劑四,120μL蒸餾水,2μL試劑五,44μL蒸餾水,混勻,測(cè)定620nm處吸光值,記為A空白。

直鏈淀粉含量計(jì)算:

a.用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定的回歸方程為y=1.755x+0.0062;x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(mg/ml),y為吸光值。

1、按照蛋白濃度計(jì)算

直鏈淀粉含量(mg/mg prot)=[(A測(cè)定-A空白-0.0062)×V1]÷1.755 ÷(V1×Cpr)=0.57×(A測(cè)定-A空白-0.0062) ÷Cpr

2、按樣本干重計(jì)算

直鏈淀粉含量(mg/g干重)= [(A測(cè)定-A空白-0.0062)×V1] ÷1.755÷(W×V1÷V2) =0.57×(A測(cè)定-A空白-0.0062) ÷W

V1:加入反應(yīng)體系中樣本體積,0.02ml;V2:加入提取液體積,1 ml;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mlW:樣本質(zhì)量,g

b.96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定的回歸方程為y= 0.8775x+0.0062;x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(mg/ml),y為吸光值。

1、按照蛋白濃度計(jì)算

直鏈淀粉含量(mg/mg prot)=[(A測(cè)定-A空白-0.0062)×V1]÷0.8775 ÷(V1×Cpr)=1.14×(A測(cè)定-A空白-0.0062) ÷Cpr

2、按樣本干重計(jì)算

直鏈淀粉含量(mg/g干重)= [(A測(cè)定-A空白-0.0062)×V1] ÷0.8775/(W×V1÷V2) =1.14×(A測(cè)定-A空白-0.0062) ÷W

V1:加入反應(yīng)體系中樣本體積,0.02ml;V2:加入提取液體積,1 ml;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/ml;W:樣本質(zhì)量,g

最低檢測(cè)限為1mg/g干重或10μg/mgprot。

 

 

 

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