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β－葡萄糖醛酸苷酶（β-GD）檢測試劑盒（分光光度法 50T/48S）
| 貨號 | SH0188 | 售價(jià)（元） | 600 |
| 規(guī)格 | 50T/48S | CAS號 |
- 產(chǎn)品簡介
- 相關(guān)產(chǎn)品
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貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
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SH0188 |
β－葡萄糖醛酸苷酶（β-GD）檢測試劑盒（分光光度法 50T/48S） |
50管/48樣 |
測定意義：
β-GD廣泛存在于動物組織中，是一種參與腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移過程的基質(zhì)降解酶，具有水解固醇葡萄糖醛酸和酸性粘多糖等生理功能。該酶在肝細(xì)胞中含量較高。此外在胃癌組織中含量豐富，測定胃液β-GD活性對于研究胃癌具有重要的意義。
測定原理：
β-GD催化苯酚 β-D-葡萄糖醛酸產(chǎn)生游離的酚酞，通過測定苯酚含量反應(yīng)該酶活性高低。
組成：
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產(chǎn)品名稱 |
SH0188-50T/48S |
Storage |
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提取液：液體 |
60ml |
4℃ |
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試劑一：液體 |
5ml |
4℃ |
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試劑二：粉劑 |
1瓶 |
-20℃ |
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試劑三：液體 |
37.5ml |
4℃ |
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試劑四：液體 |
10ml |
4℃ |
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說明書 |
一份 |
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試劑二：粉劑×1瓶，-20℃保存；臨用前加入5ml蒸餾水，充分溶解待用；用不完的試劑仍-20℃保存；
試劑四：1μmol/ml標(biāo)準(zhǔn)儲備液10ml，4℃保存；
自備儀器和用品：
可見分光光度計(jì)、水浴鍋、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
樣品測定的前處理
按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
測定步驟：
1、分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至540nm，蒸餾水調(diào)零。
2、樣本測定（在EP管中加入下列試劑）
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試劑名稱（μl） |
加樣孔 |
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測定管 |
標(biāo)準(zhǔn)管 |
空白管 |
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試劑一 |
100 |
100 |
100 |
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試劑二 |
100 |
100 |
100 |
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樣本 |
50 |
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50 |
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蒸餾水 |
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50 |
混勻后，37℃水浴30min
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試劑三 |
750 |
750 |
750 |
混勻， 540nm下測定各管吸光值
注意：標(biāo)準(zhǔn)管和空白管只需測一次。
β-GD活性計(jì)算：
（1）按樣本鮮重計(jì)算：
單位定義：每小時(shí)每g鮮重樣品中催化產(chǎn)生 1μmol酚酞的量為一個(gè)活力單位。
β-GD（μmol/h/g 鮮重）= (C標(biāo)準(zhǔn)管×V1)×（A測定管-A空白管）÷（A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管）÷(W×V1÷V2)÷T=2×（A測定管-A空白管）÷（A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管）÷W
（2）按樣本蛋白濃度計(jì)算：
單位定義：每小時(shí)每mg組織蛋白催化產(chǎn)生 1μmol酚酞的量為一個(gè)活力單位。
β-GD（μmol/h /mg prot）= (C標(biāo)準(zhǔn)管×V1)×（A測定管-A空白管）÷（A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管）÷(V1×Cpr)÷T=2×（A測定管-A空白管）÷（A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管）÷Cpr
C標(biāo)準(zhǔn)管：標(biāo)準(zhǔn)管濃度， 1μmol/ml；V1：加入樣本體積：0.05ml；V2：加入提取液體積，1ml；T：反應(yīng)時(shí)間，0.5h；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/ml；W：樣本鮮重，g。