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羥自由基清除能力測(cè)定試劑盒(微量法100T/96S)

貨號(hào) SH0054 售價(jià)(元) 780
規(guī)格 100T/96S CAS號(hào)
  • 產(chǎn)品簡介
  • 相關(guān)產(chǎn)品

貨號(hào)

名稱

規(guī)格

SH0054

羥自由基清除能力測(cè)定試劑盒(微量法100T/96S)

100T/96S

正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定                                             

測(cè)定意義:

羥自由基作用于體內(nèi)蛋白質(zhì)、核酸、脂類等生物分子,造成細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能受損,進(jìn)而導(dǎo)致體內(nèi)代謝紊亂引起疾病。羥自由基清除能力是樣品抗氧化能力的重要指標(biāo)之一,在抗氧化類保健品和藥品研究中得到廣泛應(yīng)用。

測(cè)定原理:

H2O2/ Fe2+ 通過Fenton反應(yīng)產(chǎn)生羥自由基,將鄰二氮菲- Fe2+水溶液中Fe2+氧化為Fe3+ ,導(dǎo)致536nm吸光度下降,樣品對(duì)536nm吸光度下降速率的抑制程度,反映了樣品清除羥自由基的能力。

組成:

產(chǎn)品名稱

SH0054-100T/96S

Storage

緩沖液:液體

100ml

4℃

試劑一:液體

12ml

4℃避光

試劑液體

6ml

4℃避光

試劑液體

12ml

4℃

試劑液體

6ml

4℃

說明書

一份

自備儀器和用品:

恒溫水浴鍋、酶標(biāo)儀、96孔板和蒸餾水。

樣品的制備

1. 組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液)進(jìn)行冰浴勻漿,然后10000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

2. 血清、果汁等液體樣品可直接測(cè)定。

3. 提取物(或者藥物)可配制成一定濃度,如5 mg/ml

測(cè)定操作表

1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長至536nm。

2、 工作液配制:使用之前按照每管試劑一:試劑二:試劑三=100:50:100μl)的比例配制,用多少配多少,混勻。

3、 EP管中加入如下試劑

 

空白管

對(duì)照管

測(cè)定管

工作液μl

250

250

250

混勻,防止局部顏色過濃

樣品(μl

 

 

50

試劑四(μl

 

50

50

H2Oμl

100

50

 

混勻,37保溫60min,8000g 25℃離心5min,吸取200μl96孔板中測(cè)定536nm吸光值,空白管、對(duì)照管和測(cè)定管的吸光值分別記為A空、A對(duì)和A測(cè)。

注意:空白管和對(duì)照管只需測(cè)定一次。

計(jì)算公式:

羥自由基清除率 D% =A測(cè)-A對(duì))÷A-A對(duì))×100%

A空、A對(duì)、A測(cè):空白管、對(duì)照管和測(cè)定管的吸光值。

注意事項(xiàng):

為了比較不同樣品羥自由基清除能力,對(duì)于同一批樣品必須加入等量的樣品,血清、組織勻漿、果汁等液體樣品加入同樣體積,提取物(或者藥物)配制成同樣濃度。

 

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