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AF350 Phalloidin 鬼筆環(huán)肽-AF350

貨號 LX8717 售價(jià)(元) 4092
規(guī)格 300T CAS號
  • 產(chǎn)品簡介
  • 相關(guān)產(chǎn)品

產(chǎn)品信息

貨號

名稱

規(guī)格

價(jià)格/

LX8717

AF350 Phalloidin鬼筆環(huán)肽-AF350

300T

4092




產(chǎn)品簡介

鬼筆環(huán)肽(Phalloidin)的結(jié)合阻止絲狀肌動蛋白(微絲)的解離,穩(wěn)定微絲結(jié)構(gòu),從而破壞微絲的聚合-去聚合的動態(tài)平衡。此特性使得肌動蛋白聚合發(fā)生的臨界濃度(CC)降至<1μg/mL,因此,可用作一種聚合促進(jìn)劑。此外,鬼筆環(huán)肽還可抑制F-actinATP水解活性。

鬼筆環(huán)肽-AF350標(biāo)記探針會選擇性地結(jié)合F-肌動蛋白。以納摩爾濃度使用,鬼筆環(huán)肽衍生物是方便的探針,用于標(biāo)記,鑒定和定量甲醛固定和透化組織切片中的F-肌動蛋白,細(xì)胞培養(yǎng)物或無細(xì)胞實(shí)驗(yàn)。肌動蛋白是一種球狀的,大約42kDa的蛋白質(zhì),幾乎存在于所有真核細(xì)胞中。 它也是最高度保守的蛋白質(zhì)之一,與藻類和人類不同的物種相差不超過20%。 肌動蛋白是細(xì)胞中兩種細(xì)絲的單體亞基:微絲,細(xì)胞骨架的三個主要組分之一,以及微絲,是肌細(xì)胞中收縮裝置的一部分。 因此,肌動蛋白參與許多重要的細(xì)胞過程,包括肌肉收縮,細(xì)胞運(yùn)動,細(xì)胞分裂和胞質(zhì)分裂,囊泡和細(xì)胞器運(yùn)動,細(xì)胞信號傳導(dǎo),以及細(xì)胞連接和細(xì)胞形狀的建立和維持。

鬼筆環(huán)肽比肌動蛋白單體更緊密地結(jié)合肌動蛋白絲,導(dǎo)致肌動蛋白亞基從絲狀末端解離的速率常數(shù)降低,基本上通過防止絲解聚來穩(wěn)定肌動蛋白絲。此外,發(fā)現(xiàn)鬼筆環(huán)肽抑制F-肌動蛋白的ATP水解活性。鬼筆環(huán)肽在細(xì)胞中以不同濃度起作用不同。當(dāng)以低濃度引入細(xì)胞質(zhì)時,鬼筆環(huán)肽將較少聚合形式的細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白以及微絲蛋白聚集成聚集的肌動蛋白聚合物的穩(wěn)定,但它不會干擾應(yīng)力纖維,即厚的微絲束。鬼筆環(huán)肽的性質(zhì)是通過用熒光類似物標(biāo)記鬼筆環(huán)肽并用它們?nèi)旧拥鞍捉z用于光學(xué)顯微鏡來研究F-肌動蛋白在細(xì)胞中的分布的有用工具。鬼筆環(huán)肽的熒光衍生物已經(jīng)證明在定位活細(xì)胞或固定細(xì)胞中的肌動蛋白絲以及在體外可視化單個肌動蛋白絲方面非常有用。熒光鬼筆環(huán)肽衍生物已被用作高分辨率肌動蛋白研究中的重要工具。

本品以1000×儲存液形式(溶于DMSO)提供,按照100μl/孔(96孔板),總共可做300T。

注意事項(xiàng):   

鬼筆環(huán)肽  的分子量小,很容易通過細(xì)胞,不需要對細(xì)胞進(jìn)行冷丙酮和TRITON X-100處理。毒性較大,戴上手套操作。

有幾種方法都能用來染色組織細(xì)胞培養(yǎng)物內(nèi)的肌動蛋白絲(F-actin)染色,其中,固定步驟在獲得可信且具代表性的細(xì)胞F-actin分布情況中至關(guān)重要。固定步驟基于實(shí)驗(yàn)自身需求來選擇。多聚甲醛或戊二醛都能得到優(yōu)秀的F-actin染色和良好的板狀偽足維持保存。

操作步驟

1.制備1X鬼筆環(huán)肽綴合物工作溶液:加入1μL1000X鬼筆環(huán)肽綴合物DMSO溶液至1 mL1BSAPBS。

注意1:鬼筆環(huán)肽綴合物的未使用的1000X DMSO儲備溶液應(yīng)等分并儲存在-20℃,避光。

注意2:不同的細(xì)胞類型可能染色不同。 應(yīng)相應(yīng)地制備鬼筆環(huán)肽綴合物工作溶液的濃度。

2.染色細(xì)胞:

2.1執(zhí)行甲醛固定。 在室溫下將含3.0-4.0%甲醛的細(xì)胞在PBS中孵育10-30分鐘。

注意:避免使用任何含甲醇的固定劑,因?yàn)榧状紩诠潭ㄟ^程中破壞肌動蛋白。 優(yōu)選的固定劑是不含甲醇的甲醛。

2.2用PBS沖洗固定的細(xì)胞2-3次。

2.3可選:在PBS中加入0.1Triton X-100固定細(xì)胞35分鐘,以增加滲透性。 用PBS沖洗細(xì)胞2-3次。

2.4將100μL/孔(96孔板)鬼筆環(huán)肽綴合物工作溶液加入固定的細(xì)胞,并在室溫下染色細(xì)胞2090分鐘。

2.5在加上蓋玻片之前,用PBS輕輕沖洗細(xì)胞23次以除去過量的鬼筆環(huán)肽綴合物,然后在顯微鏡下進(jìn)行,密封和成像。

相關(guān)產(chǎn)品:

貨號

名稱

規(guī)格

價(jià)格/

LX4520

FITC-Phalloidin  FITC-鬼筆環(huán)肽

300T

2006.4

LX2226

FITC-Phalloidin  FITC-鬼筆環(huán)肽

1mg

5199

LX4530

Phalloidin-Tetramethylrhodamine Conjugate TRITC-鬼筆環(huán)肽

300T

2006.4

LX4540

鬼筆環(huán)肽-加州紅 Phalloidin-California Red Conjugate

300T

2006.4

LX3801

鬼筆環(huán)肽-iFluor? 350 Phalloidin-iFluor? 350 Conjugate

300T

2006.4

LX4801

鬼筆環(huán)肽-iFluor? 405 Phalloidin-iFluor? 405 Conjugate

300T

2006.4

LX6801

鬼筆環(huán)肽-iFluor? 514  Phalloidin-iFluor? 514 Conjugate

300T

2006.4

LX7801

鬼筆環(huán)肽-iFluor? 532 Phalloidin-iFluor? 532 Conjugate

300T

2006.4

LX8801

鬼筆環(huán)肽-iFluor? 594  Phalloidin-iFluor? 594 Conjugate

300T

2006.4

LX1710

鬼筆環(huán)肽-iFluor? 633  Phalloidin-iFluor? 633 Conjugate

300T

2006.4

LX2711

鬼筆環(huán)肽-iFluor? 647 Phalloidin-iFluor? 647 Conjugate

300T

2006.4

LX3712

鬼筆環(huán)肽-iFluor? 680  Phalloidin-iFluor? 680 Conjugate

300T

4092

LX4713

鬼筆環(huán)肽-iFluor? 700  Phalloidin-iFluor? 700 Conjugate

300T

4092

LX5714

鬼筆環(huán)肽-iFluor? 750  Phalloidin-iFluor? 750 Conjugate

300T

4092

LX5715

鬼筆環(huán)肽-iFluor? 790  Phalloidin-iFluor? 790 Conjugate

300T

4092

LX1610

鬼筆環(huán)肽-AF488 AF488 Phalloidin

300T

4092

LX2610

鬼筆環(huán)肽-AF594AF594 Phalloidin

300T

4092

LX0226

Amino-Phalloidin 氨基鬼筆環(huán)肽

1mg

6199

LX1801

iFluor? 488 phalloidin iFluor? 488標(biāo)記鬼筆環(huán)肽(綠色)

300T

1857

LX2801

iFluor? 555 phalloidin iFluor? 555標(biāo)記鬼筆環(huán)肽(橘色)

300T

1857

LX2800

Phalloidin 鬼筆環(huán)肽

1MG

5299


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