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產(chǎn)品簡介

木瓜蛋白酶（Papain），一種半胱氨酸蛋白酶，具有廣泛且特異的切割活性。包含肽鏈內(nèi)切酶活性，可裂解堿性氨基酸、亮氨酸或甘氨酸肽鍵；還具有酰胺酶以及酯酶活性。該酶由單一肽鏈組成，包含3個(gè)二硫鍵和1個(gè)維持酶活性的巰基基團(tuán)，其活性位點(diǎn)包含7個(gè)亞單位（S1-S4和S1’-S3’），其中每個(gè)亞單位可容納底物1個(gè)氨基酸殘基。其活性主要由S2亞單位控制，該單位為可容納底物分子P2側(cè)鏈的疏水區(qū)，Papain特異性主要決定于位于該疏水區(qū)的疏水氨基酸或芳香族氨基酸殘基。

木瓜乳液至少富含4種半胱氨酸內(nèi)肽酶，包括木瓜酶、木瓜凝乳蛋白酶、氨基乙酰基肽鏈內(nèi)切酶和木瓜蛋白酶Ω等。存在于乳汁細(xì)胞中的內(nèi)肽酶處于非活化狀態(tài)，但是一旦從乳汁細(xì)胞中分泌出來則迅速轉(zhuǎn)化為活性狀態(tài)。木瓜蛋白酶在上述內(nèi)肽酶中含量很少，但是該酶易于分離純化，研究的也最多。在生化研究中具有多種應(yīng)用：1）在某些組織的水解過程中，木瓜蛋白酶比其他蛋白酶作用效果更好，但破壞性更低，常用于原代或神經(jīng)元細(xì)胞解離，例如，木瓜蛋白酶可從產(chǎn)后小鼠中分離具有活力和完整細(xì)胞形態(tài)的皮質(zhì)神經(jīng)元、平滑肌細(xì)胞等。其研究表明，該酶分離得到的平滑肌細(xì)胞對(duì)興奮刺激的敏感性不受影響；2）用于某些蛋白質(zhì)或酶的結(jié)構(gòu)研究；3）用于紅細(xì)胞血清學(xué)修飾紅細(xì)胞表面以增強(qiáng)或破壞一些紅細(xì)胞表面抗原的反應(yīng)性；4）用于血小板血清學(xué)；5）用于氨基酸、多肽、其他分子的酶促合成；6）從IgG和IgM中制備抗體Fab 片段；7）完整膜蛋白酶的溶解；8）用于從純化的蛋白多糖內(nèi)生產(chǎn)糖蛋白。

本品為經(jīng)兩次結(jié)晶懸液制備得到的凍干粉末，來源于番木瓜乳液（Carica papaya latex），比活力≥15 units/mg protein。

產(chǎn)品性質(zhì)

CAS NO：9001-73-4

同義名：Papainase, papaya peptidase I

分子式：C40H30N10O6Cl2

分子量：23.4 kDa

活性位點(diǎn)（Active Site Residues）：Cysteine (C158)；Histidine (H292)；Asparagine (N308)

等電點(diǎn)（Isoelectric point,pI）：8.88

單位定義（Unit definition）：One Unit hydrolyzes one micromole of   benzoyl-L-arginine ethyl ester per minute at 25℃, pH 6.2, after activation in   a solution containing 1.1 mM EDTA, 0.067 mM mercaptoethanol and 5.5 mM   cysteine-HCl for 30 minutes.

最佳pH：6.0-7.0

抑制劑（Inhibitors）：PMSF; TLCK, TPCK;   alph2-macroglobulin; AEBSF; Antipain; Hg2+ andother heavy   metals; cystatin; E-64; Leupeptin; Sulfhydryl binding agents; Carbonyl   reagents; Alkylating agents

激活劑（Activators）：Cysteine; Sulfide and sulfite;   N-bromosuccinimide; Heavy metal chelating agents like EDTA;

運(yùn)輸和保存方法

冰袋運(yùn)輸。4℃保存。有效期6個(gè)月。

注意事項(xiàng)

為保證得到完全活性的木瓜蛋白酶，該酶需在酶活化緩沖液（含1.1 mM EDTA，0.067 mM mercaptoethanol和5.5 mM cysteine-HCl）中孵育30 min。建議使用前用0.22 μm濾膜過濾。

制備好的木瓜蛋白酶懸液放到4℃保存，不可凍存。

含有NaCl的木瓜蛋白酶懸液4℃保存約可穩(wěn)定保存幾個(gè)月，沒有明顯的酶活力喪失。

為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

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